成果信息
本發(fā)明提供了一種同時(shí)檢測乙型肝炎病毒三種核苷酸類似物耐藥位點(diǎn)的方法及其試劑盒,,該發(fā)明以乙型肝炎病毒基因型序列為基礎(chǔ),在HBV聚合酶區(qū)域設(shè)計(jì)了四條巢式擴(kuò)增引物和針對十個(gè)耐藥位點(diǎn)的二十七條野生,、耐藥檢測的寡核苷酸探針,,使用地高辛標(biāo)記的寡核苷酸通用引物進(jìn)行巢式PCR反應(yīng)擴(kuò)增靶DNA片段,,利用被標(biāo)記的靶DNA擴(kuò)增產(chǎn)物與特異性寡核苷酸探針在基質(zhì)上雜交,,通過雜交結(jié)合物偶聯(lián)的酶促顯色反應(yīng),,判斷HBV對三種核苷酸類似物耐藥的存在。該方法提高了檢測的準(zhǔn)確性,、可靠性,、靈敏度,可以同時(shí)檢測三種核苷類似物的10個(gè)耐藥位點(diǎn),,從而實(shí)現(xiàn)了高通量,,多位點(diǎn),經(jīng)濟(jì),,快速的檢測,,更加貼合臨床需求,。對實(shí)現(xiàn)早期監(jiān)測,并合理指導(dǎo)臨床個(gè)體化用藥有著重要的意義,。)
背景介紹
乙型肝炎病毒的感染呈世界范圍廣泛流行,,尤其我國感染者占到全球的1/3,慢性感染者中的5%-10%可導(dǎo)致肝癌(HCC),,30%進(jìn)展為肝硬化,而肝硬化患者中的23%會(huì)在5年內(nèi)發(fā)生肝功能衰竭,,據(jù)統(tǒng)計(jì),,我國每年用于HBV感染患者的醫(yī)療和保健費(fèi)用高達(dá)1000億人民幣,因此,,HBV感染嚴(yán)重危害人民健康,,造成國民經(jīng)濟(jì)嚴(yán)重?fù)p失。 )
應(yīng)用前景
該技術(shù)目前被廣泛應(yīng)用于臨床治療,,有巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益,,市場應(yīng)用前景較為廣闊。)