成果信息
本發(fā)明公開了一種分泌抗人β-actin蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞,通過在大腸桿菌中原核表達人β-actin融合蛋白,,以純化的人β-actin蛋白作為抗原免疫BALB/c小鼠。經(jīng)過細胞的融合及篩選獲得能穩(wěn)定分泌抗人β-actin蛋白McAb的雜交瘤細胞,,命名為2B4,。對McAb的特異性、穩(wěn)定性和適用范圍進行了鑒定,,融合蛋白的相對分子質(zhì)量為43kDa,,可溶于8M尿素。雜交瘤細胞上清的抗體效價為1×105,,腹水的抗體效價為1×107,。Westernblot結(jié)果顯示,,單克隆抗體識別人、鼠,、兔和魚的β-actin蛋白,,與其發(fā)生特異性反應(yīng)。)
背景介紹
由于2B4分泌的單克隆抗體可以廣泛的應(yīng)用于細胞生物學(xué)和免疫學(xué)試驗,,具有良好的應(yīng)用價值,,因此開始了深入研究。)
應(yīng)用前景
2B4分泌的McAb具有較好的廣譜適用性,, 可以廣泛用作人,、鼠、兔和魚等基因表達調(diào)控研究的內(nèi)參抗體,。雜交瘤細胞系及單抗穩(wěn)定性檢測結(jié)果說明,,單抗的雜交瘤細胞系和單抗的穩(wěn)定性都是非常好,長期保存不會使抗體效價降低,。多項數(shù)據(jù)表明2B4分泌的McAb能廣泛應(yīng)用于多種生物和組織的細胞生物學(xué)和免疫學(xué)試驗,,具有良好應(yīng)用前景和以及進行產(chǎn)業(yè)化。)